Práctica 7

1.       Actividades, datos, cálculos y discusión de resultados.

Experimento 1: Cromatografía en papel

Se nos proporcionó papel filtro y lo cortamos en 3 tiras lo suficientemente delgadas como para introducirlas dentro del tubo de ensaye, nuestra compañera Giselle dibujó 2 líneas en el papel filtro (una 2cm por arriba de la otra).

Nuestro compañero Honorio preparó en la campana de extracción una solución de éter, acetona y benceno a proporción de 85:10:5; se hizo esta solución a una probeta de 50ml y se pasó a una probeta de 100ml; posteriormente se pasó un poco de esta solución a un tubo de ensaye, mientras se hacía lo anterior nuestro compañero Gibrán machacó en el mortero 2 compuestos que nos fueron asignados (en este caso pimiento rojo y amarillo) (cada equipo tenía compuestos diferentes, entre ellos zanahoria, espinaca, nochebuena, etc.) después se le añadió alcohol.

Con una pipeta Pasteur se tomó un poco de la sustancia con alcohol y en la marca de la tira del papel filtro se puso un poco de la mezcla (esto fue para que corriera desde un punto especial o control).

Se repitió este proceso con otro tubo (en uno de los tres tubos no se hará nada, pues es el control), posteriormente se dejó la sustancia correr y logramos observar que los resultados de otros equipos fueron distintos.

Experimento 2: Cromatografía en columna

Para iniciar se tomaron 3 pipetas Pasteur, en 2 se colocó algodón para crear una especie de tapón para que no deje pasar el carbonato de calcio ni el sulfato de sodio, la otra pipeta sirvió para tomar la muestra y ponerla en el punto límite.

Para realizar esta cromatografía, se tomaron 2 pipetas Pasteur, la primera con sulfato de sodio y la otra con carbonato de calcio hasta el punto límite.

Con la pipeta sin algodón se tomaron 2 compuestos de nuestra elección de los otros equipos y se colocó una pequeña muestra en una pipeta y el otro en la otra pipeta, respectivamente con los compuestos de sulfato y carbonato.

Nosotros elegimos para el carbonato zanahoria y para el sulfato pimiento amarillo y nos llevamos las pipetas a nuestras casas ya que los resultados se verían en 1 o 2 días.

2.       Cuestionario.

1.              ¿Cuál es el principio de las técnicas cromatográficas?

Todos los sólidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor o menor grado otras  sustancias  sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias  pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía

2.              ¿Cuáles fases constituyen un sistema cromatográfico y en qué consisten?

Se conforma de 2 fases inmiscibles: La fase móvil, llamada también activa, que transporta las  sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.

3.              ¿Qué factores pueden afectar al Rf?

Condiciones en las que se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente) así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación)

4.              Mencione y fundamente 2 técnicas cromatográficas modernas.

Cromatografía de líquidos de alta resolución

La cromatografía de líquidos de alta eficacia es la técnica analítica de separación más ampliamente utilizada (el tamaño de las partículas de fase fija se disminuye hasta los micrones, usando altas presiones para lograr) que la fase móvil pueda fluir. Las razones son la sensibilidad, su fácil adaptación a las determinaciones cuantitativas exactas, es ideal para la separación de especies no volátiles o termolábiles y por su gran aplicabilidad a sustancias  que son de interés en la industria. Algunos ejemplos son: aminoácidos, proteínas, ácidos nucleicos, hidrocarburos, carbohidratos, fármacos, terpenoides, plaguicidas, antibióticos, esteroides y gran variedad de sustancias inorgánicas. La fase móvil es un líquido y la fase estacionaria es una columna que puede ser de acero inoxidable.

Cromatografía HPLC acoplada a Ultravioleta (UV)

Se usa cuando los componentes absorben  radiación UV- visible, como los compuestos aromáticos, alquenos, moléculas con enlaces C-O, C-N, C-S. La detección UV-visible no es destructiva, es estable en el tiempo y se afecta poco por la temperatura, por lo que se puede colectar los componentes por separado. Se considera a la detección UV como selectiva ya que se elige la longitud de onda de mayor absorbancia de acuerdo con la sustancia que se desea conocer

3.       Conclusiones y recomendaciones.

En esta práctica tuvimos dificultades debido a que colocamos algodón en una pipeta donde no debía colocarse. En la cromatografía de papel usamos zanahoria y pimiento amarillo; la zanahoria corrió completamente el betacaroteno, pero el pimiento amarillo no corrió, al principio se pensó que realizamos mal experimento, pero comprobamos con los otros equipos y tampoco se corrió, a pesar de ello, concordamos con los demás equipos que los objetivos se cumplieron.

El realizar esta práctica fue un poco complicado, pero fue una en donde mejor trabajamos y donde mejor se cumplieron los objetivos.

Se recomienda colocar con mayor cuidado el algodón dentro de la pipeta Pasteur, debido a que es muy difícil retirar el algodón que se halla colocado de mal forma y para esto, se debe colocar de poco en poco la cantidad de algodón y después se deberá comprimir para que no pase el sulfato de sodio o el carbonato de calcio; también se recomienda comprimir bien el compuesto de tal forma que este bien apretado y presionado, todo esto para obtener mejores resultados.

4.       Referencias.

Universidad Nacional Autónoma de México (2007). Técnicas Cromatográficas. (En línea) Recuperado el 22 de febrero del 2012, de   http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatogrficos_6700.pdf